
蛋白表達(dá)在包涵體中時,可以采取以下方法進(jìn)行處理:
1. 增加溶解蛋白質(zhì)的可溶性:通過優(yōu)化蛋白表達(dá)系統(tǒng)的培養(yǎng)條件、調(diào)節(jié)溫度、添加化學(xué)品等方式,增加蛋白質(zhì)的可溶性,使其不再形成包涵體。
2. 優(yōu)化蛋白折疊和修飾:包涵體通常是由于蛋白質(zhì)不能正確折疊或者無法被修飾所導(dǎo)致的。通過優(yōu)化蛋白質(zhì)的折疊機(jī)構(gòu),如添加分子伴侶、調(diào)節(jié)泛素化修飾等方式,可以促進(jìn)蛋白質(zhì)的正常折疊和修飾。
3. 增加溶液的溫度和濃度:將包涵體中的蛋白質(zhì)提取到溶液中,可以增加溶液的溫度和濃度,利用熱激和蛋白質(zhì)間的相互作用來使蛋白質(zhì)溶解。
4. 進(jìn)行蛋白質(zhì)的重折疊:包涵體通常是由于蛋白質(zhì)原初折疊不正確導(dǎo)致的。通過添加還原劑(如DTT)或者變性劑(如尿素、SDS)等,可以使蛋白質(zhì)失去原來的二級結(jié)構(gòu),重折疊成新的形態(tài),從而使蛋白質(zhì)重新溶解。
5. 利用特殊的溶劑或化學(xué)品:有些蛋白質(zhì)可能需要特定的溶劑或化學(xué)品才能溶解。通過優(yōu)化蛋白質(zhì)溶解液的成分,如添加某些溶劑(如尿素、甘油)、界面活性劑(如Tween-20、Triton X-100)等,可以促進(jìn)蛋白質(zhì)的溶解。
對于包涵體形成的蛋白質(zhì),可以通過優(yōu)化蛋白表達(dá)系統(tǒng)的培養(yǎng)條件、調(diào)節(jié)折疊機(jī)構(gòu)、增加溶液溫度和濃度、進(jìn)行重折疊以及利用特殊的溶劑或化學(xué)品等方式進(jìn)行處理,以提高蛋白質(zhì)的溶解度。
在包涵體中怎么辦)
從整體來看,蛋白質(zhì)相較于紅肉一般更容易消化。但這并不意味著所有人都會覺得蛋白質(zhì)比紅肉更容易消化,因為消化速度還受到個體差異、食物種類和烹飪方式等多種因素的影響。
在包涵體中怎么辦)